Sodium sitrat buffer sering digunakan untuk isolasi RNA, karena meminimalkan hidrolisis basa dari untaian RNA, membuatnya sangat berharga untuk pemurnian mRNA selama genomik penelitian, dan untuk mempelajari transkripsi. Buffer berbasis sitrat juga membantu pendeteksian antigen pada preparasi jaringan tetap, karena mereka memutus ikatan silang yang terbentuk antara antigen dan media fiksasi.
Dengan langkah-langkah mudah berikut, seseorang dapat membuat buffer natrium sitrat dengan pH 6 (asam) dalam waktu kurang dari 10 menit.
Bahan untuk Sodium Citrate Buffer
Beberapa bahan diperlukan untuk membuat buffer natrium sitrat. Dengan asam sitrat, seseorang hanya membutuhkan 1M natrium hidroksida, air suling, dan probe pH terkalibrasi. Sodium sitrat adalah opsional.
Pembuatan buffer juga membutuhkan silinder ukur 1 liter, labu volumetrik 1 liter, dan tiga botol media 1 liter. Akhirnya, Anda membutuhkan batang pengaduk magnet dan pengaduk magnet. Semua materi ini dapat ditemukan di sekolah, laboratorium tempat kerja atau dibeli secara online atau di toko-toko barang khusus.
Dua Pilihan untuk Membuat Buffer
Ada dua metode membuat buffer natrium sitrat, tergantung pada bahan yang dapat Anda akses.
- Jika Anda memiliki asam sitrat dan basa konjugasi, buat larutan stok masing-masing dengan mencampur 21 gram asam sitrat dalam 1 liter air suling, dan 29,4 gram natrium sitrat dalam 1 liter suling air.
- Jika Anda hanya memiliki asam sitrat, campur 2,1 gram hanya di bawah 1 liter air suling.
Mencampur Asam Sitrat dan Sodium Sitrat
Campurkan 82 mililiter larutan asam sitrat dengan 18 mililiter larutan natrium sitrat. Untuk ini, tambahkan air suling yang cukup untuk membawa volume campuran sedikit di bawah 1 liter.
Menyesuaikan pH
Selagi mengaduk larutan dengan pengaduk magnetik, gunakan 1M natrium hidroksida untuk mengatur pH campuran menjadi 6,0. Kemudian, dengan labu volumetrik, tambahkan lebih banyak air suling untuk membawa volume total akhir larutan hingga tepat 1 liter.