Penggunaan siRNA dalam Penelitian Genetika Molekuler

siRNA, yang merupakan singkatan dari Ribonucleic Acid kecil yang mengganggu, adalah kelas molekul RNA beruntai ganda. Kadang-kadang dikenal sebagai RNA mengganggu pendek atau membungkam RNA.

RNA interferensi kecil (siRNA) adalah potongan kecil RNA untai ganda (ds), biasanya panjangnya sekitar 21 nukleotida, dengan overhang 3 '(diucapkan tiga prima) (dua nukleotida) di setiap ujung yang dapat digunakan untuk "mengganggu" dengan terjemahan protein dengan mengikat dan mempromosikan degradasi messenger RNA (mRNA) pada spesifik urutan

Fungsi siRNA

Sebelum menyelam ke dalam apa sebenarnya siRNA (jangan dikelirukan dengan miRNA), penting untuk mengetahui fungsi RNA. Asam Ribonukleat (RNA) adalah asam nukleat yang ada dalam semua sel hidup dan bertindak sebagai pembawa pesan yang membawa instruksi dari DNA untuk mengendalikan sintesis protein.

Pada virus, RNA dan DNA dapat membawa informasi.

Dengan melakukan itu, siRNA mencegah produksi protein spesifik berdasarkan urutan nukleotida dari mRNA yang sesuai. Proses ini disebut interferensi RNA (RNAi), dan dapat juga disebut sebagai siRNA silencing atau siRNA knockdown.

instagram viewer

Dari mana mereka datang

siRNA umumnya dianggap berasal dari untaian yang lebih panjang dari pertumbuhan eksogen atau berasal dari luar organisme (RNA yang diambil oleh sel dan menjalani proses lebih lanjut).

RNA sering berasal vektor, seperti virus atau transposon (gen yang dapat mengubah posisi dalam genom). Ini telah ditemukan memainkan peran dalam pertahanan antivirus, degradasi mRNA atau mRNA yang diproduksi berlebihan yang terjemahannya dibatalkan, atau mencegah gangguan DNA genom oleh transposon.

Setiap untaian siRNA memiliki gugus fosfat 5 '(lima prima) dan gugus 3' hidroksil (OH). Mereka diproduksi dari dsRNA atau hairpin looped RNA yang, setelah memasuki sel, dipecah oleh enzim mirip-RNase III, yang disebut Dicer, menggunakan RNase atau enzim restriksi.

SiRNA kemudian dimasukkan ke dalam kompleks protein multi-subunit yang disebut RNAi-induced silencing complex (RISC). RISC "mencari" target mRNA yang tepat, di mana siRNA kemudian terurai dan, diyakini, antisense strand mengarahkan degradasi strand komplemen mRNA, menggunakan kombinasi endo dan exonuclease enzim

Penggunaan Medis dan Terapi

Ketika sel mamalia dihadapkan dengan RNA untai ganda seperti siRNA, ia mungkin salah mengartikannya sebagai produk sampingan virus dan memulai respons imun. Selain itu, pengenalan siRNA dapat menyebabkan penargetan yang tidak diinginkan di mana protein lain yang tidak mengancam juga dapat diserang dan dihancurkan.

Memperkenalkan siRNA terlalu banyak ke dalam tubuh dapat menyebabkan kejadian tidak spesifik karena respon imun bawaan aktivasi, tetapi mengingat kemampuan untuk mengalahkan gen yang diinginkan, siRNA memiliki potensi untuk banyak kegunaan terapeutik.

Banyak penyakit yang berpotensi diobati dengan menghambat ekspresi gen, dengan memodifikasi siRNA secara kimia untuk meningkatkan sifat terapeutik mereka. Beberapa properti yang dapat ditingkatkan adalah:

  • Aktivitas yang ditingkatkan
  • Meningkatkan stabilitas serum dan mengurangi target
  • Penurunan aktivasi imunologis

Oleh karena itu, desain siRNA sintetis untuk penggunaan terapeutik telah menjadi tujuan populer banyak perusahaan biofarmasi.

Database terperinci dari semua modifikasi kimia tersebut dikuratori secara manual di siRNAmod, sebuah database yang dikuratori secara manual dari siRNAs yang dimodifikasi secara kimiawi yang divalidasi secara eksperimen.