Di dalam percobaan kimia, solusi biru secara bertahap menjadi jelas. Ketika labu cairan diaduk, larutan berubah menjadi biru. Reaksi botol biru mudah dilakukan dan menggunakan bahan yang tersedia. Berikut adalah instruksi untuk melakukan demonstrasi, penjelasan tentang kimia yang terlibat, dan opsi untuk melakukan percobaan dengan warna lain:
Hindari kontak dengan kulit dengan solusi, yang mengandung bahan kimia kaustik. Reaksi menetralkan larutan, sehingga dapat dibuang hanya dengan menuangkannya ke saluran pembuangan.
Dalam reaksi ini, glukosa (suatu aldehida) dalam larutan alkali secara perlahan dioksidasi oleh dioksigen untuk membentuk asam glukonat:
Asam glukonat diubah menjadi natrium glukonat dengan adanya natrium hidroksida. Methylene blue mempercepat reaksi ini dengan bertindak sebagai agen transfer oksigen. Dengan mengoksidasi glukosa, metilen biru itu sendiri berkurang (membentuk leucomethylene biru) dan menjadi tidak berwarna.
Jika ada cukup oksigen yang tersedia (dari udara), leucomethylene blue dioksidasi ulang dan warna biru larutan dapat dipulihkan. Saat berdiri, glukosa mengurangi pewarna biru metilen dan warna larutan menghilang. Dalam larutan encer, reaksi berlangsung pada 40 derajat hingga 60 derajat Celcius, atau pada suhu kamar (dijelaskan di sini) untuk solusi yang lebih pekat.
Selain warna biru / bening / biru dari reaksi biru metilen, indikator lain dapat digunakan untuk reaksi perubahan warna yang berbeda. Misalnya, resazurin (7-hidroksi-3H-fenoksazin-3-satu-10-oksida, garam natrium) menghasilkan reaksi merah / bening / merah ketika diganti dengan biru metilen dalam demonstrasi. Itu reaksi indigo carmine bahkan lebih menarik, dengan perubahan warna hijau / merah-kuning / hijau.